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PCR (reazione a catena della polimerasi) | Malattie e condizioni: Test medici.

Che cos'è la PCR

La PCR è un acronimo che è noto per la reazione a catena della polimerasi ( Polymerase Chain Reactioninglese), un'avanzata tecnica scientifica che è stata inventata dal biochimico americano Kary Mullis nel 1985. Questa tecnica permette di amplificare le piccole regioni specifiche del DNA in laboratorio. Ovvero, ottenere un piccolo segmento di DNA che vuoi passare inosservato in qualsiasi analisi è moltiplicati milioni di volte e così è facile da rilevare.
Grazie a questa tecnica hanno potuto essere studi genetici in qualsiasi campo della scienza. Ad esempio, utilizzato quotidianamente per l'identificazione di cadaveri o nello studio delle scene del crimine per cercare tracce del colpevole. Utilizzato anche in biologia, per identificare la catena genetica delle piante, animali o, soprattutto, microrganismi. In medicina incontra l'esperienza di tutti quei campi e pricipalmente è usato per identificare i germi aggressori trovati nel nostro corpo.
Quando il saggio PCR è stato sviluppato per la prima volta era una tecnica piuttosto ingombrante e costosa per eseguire, ma presto il loro uso si diffuse e cominciò a sviluppare computer semplice e molto economici che sono usati ancora oggi in molti centri di diagnostici.
Inoltre, sono stati progettati più specifico PCR può essere scelto a seconda del campione per studiare. I diversi tipi di PCR, oltre il Basic, sono:
Nested PCR: get amplificare minimi campioni di DNA di miliardi di frammenti. È quindi in grado di rilevare piccoli tratti.
PCR in situ: permette la rilevazione di DNA nello stesso luogo dell'esposizione, senza la necessità di elaborarla prima con tecniche di laboratorio. Esso viene in genere utilizzato per biopsie o cella.
PCR Multiple: questo tipo di PCR sono disponibili per rilevare tracce multiple di DNA allo stesso tempo e con un singolo campione.
Con reverse transcriptase PCR: in questo caso, le catene di RNA vengono utilizzate per rilevare il DNA stampi. Enzima trascrittasi usato inverso, lo stesso utilizzato da HIV fra altri virus.
PCR quantitativa o PCR in tempo reale: aggiunto un componente fluorescente che permette di misurare la luce. Più luce, più quantità rilevate del DNA.

Quando viene effettuata una PCR

È consigliabile eseguire una PCR in tutte le situazioni in cui si desidera rilevare le catene di DNA e amplificare esso, effettuare studi su di esso o per identificare la loro esatta sequenza. Come per esempio, di seguito:
Diagnosi microbiologica: il metodo più affidabile per identificare un germe è isolato in una coltura microbiologica, ma a volte non è possibile realizzarlo, perché il metodo di coltivazione è difficile o perché è troppo costoso. In quei casi la PCR può rilevare il materiale genetico di un microrganismo che è necessario per rilevare. La raccolta del campione può essere di qualsiasi tipo:
· Sangue.
· Tampone di essudato.
· Essudato vaginale.
· Essudato rettale o sgabelli.
· Scarico uretrale o urina.
· Biopsia (pelle, midollo osseo, fegato, ecc.).
· Espettorato.
Rilevazione di mutazioni genetiche: malattie genetiche sono causate da una mutazione focale in una regione specifica del DNA. È molto difficile studiarli direttamente, così si opta per prima moltiplicare tutto il campione di DNA e conducendo studi con più ampio respiro. Così conferma la diagnosi di molte malattie come la fibrosi cistica, la Corea di Huntington, malattia di Rendu-Osler-Weber, ecc.
Gli studi di medicina legale: il suo utilizzo è molto diffuso in questo campo e ha molte applicazioni. I più comuni sono l'identificazione dei cadaveri, lo studio delle prove da scene del crimine, analisi di casi di abusi sessuali, studi di paternità, ecc. Tutti loro sono basati sull'amplificazione di DNA per studiare la loro sequenza con facilità.
Recensioni di HIV o epatiti virali: HIV ed epatite B e C virus sono costantemente nel sangue di persone infette. I livelli dovrebbero essere riesaminati periodicamente per conoscere la gravità della malattia e la rilevazione di DNA con PCR.a è usata per fare questo

Preparazione per la PCR

Se hanno intenzione di condurre uno studio con PCR , queste sono le questioni che dovrebbe tenere a mente per andare ben preparati alla prova:
Durata: raccolta del campione di solito prende pochissimo tempo, quello che serve per essere un analisi del sangue. Prende solitamente secondi o minuti. I risultati sono un po lenti solitamente parecchi giorni.
Ammissione: ammissione non è mai necessario. Raccolta del campione che si fa al momento. Può anche essere il caso che ti ha fatto il test durante un'entrata per identificare la causa della vostra malattia, ma in questo caso il motivo per il reddito sarà il vostro stato di salute.
è necessario essere accompagnati?: no, appena ricevuto una puntura quando il sangue del campione che deve essere e non è solitamente molto doloroso. Si può andare alla clinica, solo a piedi o in auto e tornare allo stesso modo.
Farmaci: non occorre assumere qualsiasi farmaco precedente. Si deve dire al medico tutti i farmaci che sta assumendo in quel momento. Alcuni farmaci possono dare risultati falsi negativi del test, per esempio, se si prendono antibiotici e desidera rilevare il germe dell'infezione.
Cibo: si può mangiare normalmente, non devi andare a digiuno. Ma se il campione è sangue è comune a cogliere la puntura di Analitica per misurare se stessi con altri parametri nel sangue (zucchero, colesterolo, ecc.), quindi la cosa migliore è che rapporti o soggiornare direttamente in digiuno se analitica è presto.
Vestiti: si possono indossare abiti normali.
Documenti: si consiglia di portare la tessera sanitaria, anche se il più delle volte è sufficiente che si portano la ruota con cui il medico ti ha inviato prova.
Gravidanza e allattamento: questo test può essere normalmente in una delle due situazioni. In realtà, è un test che viene di solito eseguito in ispezioni periodiche della gravidanza stabilito.
Controindicazioni: non ci sono controindicazioni. Devi solo valutare se davvero vale la pena il test e se i risultati servirebbe a qualcosa.

Come una PCR

Quando si arriva alla consultazione il medico vi farà alcune domande generali sul vostro stato di salute: malattie importanti fattori di rischio, stile di vita, i sintomi di infezione, ecc. Il medico chiederà il test PCR dove ritenuto necessario, ed è la migliore arma diagnostica per studiare la malattia. Dopo si esegue un esame fisico generale e valutare se è possibile ricevere un trattamento mobile o preferisce che rimani connesso.
Dopo questa prima visita, portano il campione che si terrà il PCR. Secondo la raccolta del sito di prendere uno o altre misure sono raccomandati. Ad esempio, se uretrale non dovrebbe urinare nelle due ore prima; Se si tratta di un espettorato migliore che è la prima cosa al mattino; e se è meglio sangue che corrisponde a un picco di febbre. Ma saranno quei dettagli sapete il dottore prima del test, quindi non si deve preoccupare. Se si stanno studiando la malattia genetica solitamente vi faranno una biopsia della pelle.
Una volta hanno raccolto è il campione di studio si può condurre una vita normale. In attesa dei risultati è necessario non essere nervoso e deve mantenere la vostra routine. Lo studio della PCR è effettuato in laboratorio, e non sarete consapevoli di nessuno dei passaggi della tecnica. Modo che li conosci, li Riassumiamo qui:
1. viene estratto dal campione raccolto DNA che contiene. Questo include il tuo cellule del corpo, ma anche materiale di qualsiasi germe che ha.
2. il campione è riscaldato fino a quasi 100 ° C, così che i due filamenti di DNA sono separati.
3. aggiunto al campione un soffocare; Questa è una sequenza di DNA sintetizzato in laboratorio proprio che è attaccato a un DNA noto. Ad esempio, se vogliamo rilevare citomegalovirus useremo un Primer specifici per esso.
4. il campione viene raffreddato affinché lo starter è un DNA studiato. Inizia poi un enzima chiamato DNA-polimerasi, che raddoppia il DNA per studiare.
5. ripetere tutti i passi precedenti; ogni volta che finisci un ciclo fornirà una duplicazione dei filamenti di DNA precedente.
6. con gli studi di genetica DNA già amplificati di può essere rapidamente e facilmente.

Complicanze della PCR

Complicanze della PCR sono praticamente inesistenti. È un test sicuro che non comporta rischi per le persone che sono sottoposti ad esso. L'unico rischio è quello di accettare false come risultati positivi o negativi e compiere passi sbagliati in proposito. Solitamente il campione non comporta rischi, tranne quelli delle biopsie come l'organo che avrà.

Risultati della PCR

La PCR risultati possono prendere diverse settimane poiché il campione è raccolto per studio. A prenderli lì per tenere un altro appuntamento, poiché la documentazione da solo non può essere interpretata dal paziente. In consultazione il medico sarà la più appropriata interpretazione del risultato. Se si è ammessi comunicano loro te stesso durante il vostro soggiorno in ospedale, o più tardi se dato scarico medico all'inizio.
La PCR è espressa in valori numerici, ma non non c'è nessun limite standard per tutti gli studi. Ogni obiettivo ha i propri valori, così che una PCR per il citomegalovirus di 100 non ha lo stesso valore che una PCR di Chlamydia da 100.
Il risultato della PCR solitamente può essere riassunti in positivo o negativo. Cioè il DNA che abbiamo previsto, o non trovato. Che è essenziale al fine di identificare i germi specifici e fornire un antibiotico specifico, o per diagnosticare una malattia genetica e misurare la quantità di DNA mutato.
Anche se è che un test molto efficace in grado di fornire falsi positivi. Si deve tener presente che lo starter può aderire al DNA che vogliamo rilevare, ma anche la lega per puro caso ad altri filamenti di DNA che sono vicino. Falsi negativi sono rari, poiché strettamente il DNA che viene solitamente rilevato.
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